プロテオミクス関連製品
エクソソーム精製カラム EVSecond
EVSecondは、エクソソームの高純度精製に特化したサイズ排除クロマトグラフィーカラムです。血清、血漿、細胞培養上清などから簡単に高品質のエクソソームを単離します。 (EVSecond:Extracellular Vesicle Isolation by Size Exclusion Chromatography on Drip Column)
特長
- 超遠心機などは使用せず、自然落下のみの簡単操作
- 試料中フリーRNAやフリータンパク質を高効率に除去可能なため、網羅的miRNA解析や高感度プロテオーム解析に最適
- 単離されたエクソソームは構造的ダメージがなく、幅広いアプリケーションに使用可能
- 専用ラック(GL-SPE EXO フラクションラック)を使用することで、通液や抽出液のフラクション回収が簡単に行えます。
仕様
EVSecond L70
|
EVSecond
|
|
---|---|---|
カラム長さ
|
110mm
|
75 mm
|
充填長
|
70 mm
|
50 mm
|
保存
|
冷蔵保存
(保存期間1か月) |
冷蔵保存
(保存期間1か月) |
操作
|
室温
|
低温室
|
転倒混和
|
室温
数分程度 |
低温室
数時間 |
試料量
|
50~1,500µL
|
50~700µL
|
ブロッキング後の洗浄
|
PBS 1,500µL×3回
|
PBS 700µL×6 回
|
ヒト血清からのエクソソームの単離
EVSecondを用いて100µL、200µL、300µL、700µL、のヒト血清からエクソソームを単離しました。(下図)
アルブミンやIgGなどの血清タンパク質とエクソソームが精度良く分離できていることがわかります。
100µLずつ溶出フラクションを回収
赤:抗CD9-抗CD9サンドイッチELISAによるエクソソーム溶出位置の確認
青:Bradford法による血清フリータンパク質の溶出位置の確認
データご提供:公益財団法人 がん研究会 植田 幸嗣先生
操作方法
操作は全て自然落下で行います。
1. 充填剤をよく混和してスタンドに設置し、保存液を捨てる
2. 0.22µmフィルターを通した細胞培養用ウシ血清(FBS)でブロッキング
3. PBSで3回洗浄
4. 遠心処理(12,000×g,4℃,15min)をした血清をロード(50~1,500µL)
5. PBSを適量流し、エクソソーム溶出画分を回収
注)初回は抗CD9-抗CD63サンドイッチELISAや、抗CD9ウェスタンブロッティングなどでエクソソーム溶出位置、Bradford法などにより(血清)フリータンパク質の溶出位置を確認してください。2回目以降同じサンプルを使用した際は、溶出位置の確認は必要ありません。
従来法との比較
- 超遠心法やポリマー沈殿法に比べて純度の高いエクソソームが単離できます。
- 特定のエクソソーム表面抗原をキャプチャーする抗体単離法と異なり、表面抗原のプロファイルによらない、バイアスの少ないエクソソーム回収が可能です。
品名 | 輸送区分 | SDS | 入数 | Cat.No. | 価格 |
---|---|---|---|---|---|
EVSecond L70 | 冷蔵 | JPNENG | 10本 | 5010-21395 | 70,400 |
EVSecond | 冷蔵 | 10本 | 5010-21390 | 販売中止 | |
EVSecond | 冷蔵 | 25本 | 5010-21392 | 販売中止 |
注)冷蔵は、冷蔵輸送品です。別途、冷蔵梱包費1,000円を請求させていただきます。
GL-SPE EXO フラクションラック
EVSecond専用のラックです。通液や抽出液のフラクション回収が簡単に行えます。
大きさ:約300(W) × 300(D) × 150~190(H)mm
- 回収用ラックには、回収用チューブ(1.5mL、2mL)を8本までセットできます。レバーの操作で回収用チューブの切換が可能です。
- 回収用ラックは6セット設置できます。
- 高さ調整をすることで、EVSecondとEVSecond L70の共通で使用可能です。
品名 | 入数 | Cat.No. | 価格 |
---|---|---|---|
GL-SPE EXO フラクションラック | 1式 | 5010-50450 | 187,000 |